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翼和SNP分型技術(二):Hi-SNP技術
發布時間: 2025-11-05 點擊次數: 147次選擇SNP分型服務,可根據實驗規模決定。PCR-LDR技術適用于中低通量檢測,能精準滿足小規模實驗需求;基于二代測序的Hi-SNP技術則適合高通量檢測,為大規模實驗提供高效方案。
1. Hi-SNP分型服務技術路線:

2. 分型流程
a. 位點評估:確認物種,版本,基因或序列信息,對SNP位點的同源性,(高同源不適合該方法檢測SNP,本公司有針對該狀況的特色服務),GC含量(含量過高可能導致檢測失?。┑冗M行評估,確定可行性。
b. 樣本質控:電泳及濃度綜合質控,不合格的樣本反饋給客戶。單管操作,樣本消耗量少,100ng樣本就能做幾十上百個SNP。
c. 引物設計合成:根據擴增子設計并合成引物。
d. 擴增階段:調整各對引物的體積及反應條件,使得每對引物的擴增效率相當,同時擴增多個目標DNA片段。
e. 樣本建庫:根據擴增產物進行建庫,加測序接頭,用不同barcode來區分,為測序做準備。
f. 測序及數據分析:在illumina novaseq pe150 平臺上,對擴增子進行高通量測序,然后對測序結果進行分析,出率不足的(95%以上)要補數據。完成實驗報告。
3. 翼和特色
● 自主知識產權的多重PCR為基礎,技術先進,結果準確
● 通量高,SNP位點30-500個之間,數百數千樣本推薦使用
● 平均測序深度1000倍,每個SNP位點測序深度至少幾百倍
● 適用性廣,適用于任何多態性位點
● 對SNP位點以及周圍序列進行測序,更準確,更靈敏
● 測序質量Q30>90%
● 檢出率95%以上
● 準確率>98%



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