背景與現(xiàn)有問題

安全風(fēng)險(xiǎn)與監(jiān)管要求：種源和生產(chǎn)工藝導(dǎo)致的宿主細(xì)胞殘留 DNA，給預(yù)防性或治療性生物制品帶來潛在安全風(fēng)險(xiǎn)。多數(shù)國家監(jiān)管單位對其含量和長度有明確規(guī)定，如 2020 版《中國藥典》規(guī)定以 CHO 細(xì)胞為基質(zhì)生產(chǎn)的制劑，殘留 DNA 含量不得高于 10 pg / 劑量。

現(xiàn)有檢測手段的局限：

1.熒光定量 PCR 方法因靈敏性、準(zhǔn)確性等優(yōu)勢應(yīng)用廣泛，相關(guān)公司也開發(fā)了多種試劑盒，但前處理試劑盒成分不太明確且價(jià)格高昂。

2.免前處理檢測方案和基于數(shù)字 PCR 的新一代檢測方案雖有報(bào)道，卻未成為廣泛應(yīng)用的標(biāo)準(zhǔn)。

3.殘留 DNA 長度低于 200 bp 時(shí)一般認(rèn)為無致癌風(fēng)險(xiǎn)，但研究發(fā)現(xiàn)部分疫苗中仍有少量超過 1000 bp 的片段。現(xiàn)有檢測殘留 DNA 片段化程度的手段（如毛細(xì)管電泳、改進(jìn)的微流控電泳）成本高且操作耗時(shí)。

4.腫瘤研究中已有通過 qPCR 檢測體液游離 DNA 片段化程度的方法，但鮮少用于生物制品中宿主殘留 DNA 片段化程度的直接檢測。

本試劑盒優(yōu)勢

為解決現(xiàn)有檢測方法的不足，開發(fā)出 CHO 宿主細(xì)胞殘留 DNA 檢測方案，該方案具有以下特點(diǎn)：

1.線性范圍良好：在 0.1 ng/µl-1 fg/µl 范圍內(nèi)線性良好，標(biāo)準(zhǔn)曲線 R2＞0.99。

2.檢測能力達(dá)標(biāo)：定量限為 0.5 fg/µl，與相關(guān)研究報(bào)道的檢測能力一致，達(dá)到國內(nèi)外現(xiàn)有 CHO 殘留 DNA 檢測試劑盒相同水平。

3.性能符合要求：專屬性、重復(fù)性、耐用性、回收率等經(jīng)過驗(yàn)證均符合要求。

4.可判斷樣本大小：長短片段 ΔCt 與樣本片段大小擬合曲線相關(guān)性高，可用于對樣本大小進(jìn)行直接判斷。

該研究為生物制品中 CHO 宿主細(xì)胞殘留 DNA 的檢測提供了一種新的有效方案，在提高檢測效率、降低成本等方面具有潛在價(jià)值。