APOE老年癡呆檢測介紹：

人 APOE 基因相關(guān)位點(diǎn) rs429358 和 rs7412 分型檢測試劑盒（熔解曲線法）

【貨號規(guī)格】HRAP-20；20 人份/盒

【試劑效期】6 個月

【儲存條件】試劑應(yīng)于-20℃凍存，反復(fù)凍融次數(shù)低于 3 次

【自備儀器】SLAN96 或其他四色熒光定量 PCR 儀、離心機(jī)

【樣本要求】 人口腔黏膜、全血或新鮮組織抽提得到的 DNA 樣本。樣本濃度 10-20ng/μl。樣本經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測， 須條帶單一無降解或者拖帶

【試劑組分】 APOE老年癡呆檢測組分 規(guī)格 反應(yīng)液 1 96μl*1 管 反應(yīng)液 2 20μl*1 管 dNTP 64μl*1 管 檢測液 96μl*1 管 酶 8μl*1 管 雙蒸水 600μl*1 管

【操作流程】 1、試劑配制：本試劑內(nèi)含檢測液，通過單管上機(jī)反應(yīng)對 2 個位點(diǎn)進(jìn)行分型檢測。將試劑從冰箱取出后，室 溫融化，充分顛倒混勻并瞬時離心，按照下表配制反應(yīng)體系，瞬時離心后上機(jī)檢測。 組分 反應(yīng)液 1 反應(yīng)液 2 檢測液 dNTP 雙蒸水 酶 待測樣本 加量 2μl 0.8 2.4μl 1.6μl 9μl 0.2μl 4μl 2、上機(jī)條件（檢測通道為 FAM、ROX） 擴(kuò)增部分（此步驟不需要收集熒光） 95℃ 5min 95℃ 20s 60℃ 30s 72℃ 30s 72℃ 5min 熔解曲線部分 95℃ 60s 45℃ 3min 45℃-70℃ 熔解曲線掃描 【結(jié)果判讀】試劑盒標(biāo)配無陽性對照，因此建議每次上機(jī)做 10 個以上的樣本，以方便判讀結(jié)果。三個位點(diǎn) 的基因型判讀如下所示。 50 cycles位點(diǎn) 熒光通道 熔解峰峰型 基因型 rs429358 FAM 64℃單峰 TT 69℃單峰 CC 64℃及 69℃雙峰 TC rs7412 ROX 61℃單峰 TT 66℃單峰 CC 61℃及 66℃雙峰 TC 注：陰性對照應(yīng)無熔解峰

【生產(chǎn)廠家】 企業(yè)名稱：上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司