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主營產品:主要技術服務:細胞STR鑒定;支原體檢測;細胞種屬檢測;端粒長度檢測;端粒酶活性檢測等。
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    如何為不同應用場景選用不同靈敏度的支原體檢測試劑盒!

    發布時間: 2025-05-12  點擊次數: 95次

    支原體檢測是細胞培養和相關生物制品的重要質控方案,但不同的應用場景需要選用不同的檢測試劑盒。試劑盒的選擇主要考慮幾個因素:

    1,質控的等級要求;

    等級要求最高的,是細胞與基因治療產品的最終檢測,成品檢測或放行檢。可選高靈敏度檢測試劑盒,需要較高的檢測靈敏度,至少達到10CFU/每劑,特異性要求也最高,必須無假陽性,假陰性。相對應地,樣本需要經過復雜的前處理過程,包括支原體富集,核酸抽提,然后采用高靈敏度QPCR檢測試劑(擴增45個循環,陽性閾值定為40個循環)。高靈敏試劑對整個實驗操作對環境和操作過程要求高,稍有疏漏,會出現假陽性或擴增曲線翹尾。

    對于細胞和基因治療產品中間研發過程的質控,等級要求可以適當放寬,靈敏度在100-10CFU是可以被接受的,并且很多情況下為了簡化操作,往往采取直擴的方案,即直接在QPCR體系中加入細胞上清或懸浮液進行檢測(擴增40個循環,陽性閾值定為35個循環);若想進一步提高靈敏度可采取濃縮裂解的方案,即細胞上清通過高速離心后去掉上清,加入裂解液處理。

    對于科研細胞房使用,可選用科研版直擴檢測法,擴增35個循環,陽性閾值定為32個循環,實驗對環境無菌要求不高,相應地,靈敏度要求也不高,直接上清加樣,不需要對樣本特殊處理,靈敏度在1000-100CFU,如若要節約成本,可采取混和樣本檢測。

    2,經濟成本;

    高靈敏QPCR檢測試劑盒,需要進行樣本抽提,靈敏度高,需要配備熒光定量PCR儀,成本高;直擴QPCR檢測試劑盒,不需要抽提和特殊樣本前處理,靈敏度中等,成本中等;科研版支原體檢測試劑盒,可混樣檢測,成本較低。

    3,操作的復雜程度。

    高靈敏QPCR檢測法需要濃縮,抽提樣本,可批量操作,操作難易程度中等,對實驗人員有一定的要求,操作時間4-8小時;直擴QPCR檢測法和科研版直擴法,操作比較簡單,只需要加樣上機即可,操作時間1-3小時即可。

    結合以上因素,總結如下:

    高靈敏度高靈敏支原體QPCR檢測試劑盒成品放行檢提高速率,但成本中等)。

    快速便捷直擴支原體QPCR檢測試劑盒(平衡速度與成本設備要求低,適合中間質控環節)。

        成本至上:科研版支原體檢測試劑盒(節約成本,適合科研細胞實驗室)。

     

     

     

     

     

     


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